شناسایی کلستریدیوم بوتولینوم تیپa، b و e با استفاده از multiplex pcr

نویسندگان

مجتبی سعادتی

saadati m. دانشگاه امام حسین (ع) - دانشکده علوم پایه - گروه علوم زیستی - تهران - ایران شهرام نظریان

nazarian sh. دانشگاه امام حسین (ع) - دانشکده علوم پایه - گروه علوم زیستی - تهران - ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) محمود تولایی

tavallaei m. دانشگاه امام حسین (ع) - دانشکده علوم پایه - گروه علوم زیستی - تهران - ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) جعفر امانی

amani j. دانشگاه امام حسین (ع) - دانشکده علوم پایه - گروه علوم زیستی - تهران - ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) هادی شیرزاد

چکیده

مقدمه. باکتری کلستریدیوم بوتولینوم قادر به تولید اسپور بوده و می تواند با تولید سم کشنده باعث بیماری فلج شل و یا بوتولیسم شود. تشخیص بوتولیسم با یافتن سم و یا باکتری در نمونه غذای مشکوک امکان پذیر است. روش استاندارد برای یافتن سم استفاده از حیوان آزمایشگاهی می باشد. این روش بسیار حساس و اختصاصی ولی پر هزینه، زمان بر و پر زحمت بوده ، نیاز به استفاده از حیوان آزمایشگاهی دارد و تنها تعداد معدودی از نمونه ها را می توان در یک زمان مورد بررسی قرار داد. روش های دیگری از جمله استفاده از آنتی بادی ها در سیستم تشخیص الیزا جهت تشخیص توکسین به کار رفته ولی با توجه به وجود واکنش متقاطع بین تیپ های این باکتری کمتر مورد توجه قرار گر ف ته است. در این تحقیق برای شناسایی تیپ های a ، b و e کلستریدیوم بوتولینوم که در انسان ایجاد بیماری می کنند، از روش multiplex pcr استفاده شد. مواد و روش کار. ت أی ید اولیه تیپ های باکتریایی کلستریدیوم بوتولینوم مورد استفاده در این تحقیق با روش بیوشیمیایی و نیز bioassay صورت گرفت. جهت شناسایی بوسیله pcr ، سه جفت پرایمر با دمای ذوب نزدیک به هم طراحی گردید. هر پرایمر ب ه طور اختصاصی برای ژن سم بوتولینیوم تیپ های a ، b و e عمل نموده و این سه جفت پرایمر قادر بود ب ه طور هم زمان سه سروتیپ را شناسایی نماید . نتایج. بزرگی محصول pcr تیپ های ,a b و e به ترتیب 782 ، 205 و 389 جفت باز بود که با روش هضم آنزیمی نیز صحت محصول pcr ت أی ید شد. باکتری کلستریدیوم پرفرنجنس به عنوان کنترل منفی مورد استفاده قرار گرفت و نتایج pcr آن با پرایمرهای طراحی شده منفی بود. بحث. این روش سریع، حساس و دقیق بوده و از آن در جهت شناسایی سه تیپ بیماریزای انسانی باکتری کلستریدیوم بوتولینوم می توان استفاده نمود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

شناسایی کلستریدیوم بوتولینوم تیپA، B و E با استفاده از Multiplex PCR

مقدمه. باکتری کلستریدیوم بوتولینوم قادر به تولید اسپور بوده و می ‌ تواند با تولید سم کشنده باعث بیماری فلج شل و یا بوتولیسم شود. تشخیص بوتولیسم با یافتن سم و یا باکتری در نمونه غذای مشکوک امکان ‌ پذیر است. روش استاندارد برای یافتن سم استفاده از حیوان آزمایشگاهی می ‌ باشد. این روش بسیار حساس و اختصاصی ولی پر هزینه، زمان بر و پر زحمت بوده ، نیاز به استفاده از حیوان آزمایشگاهی دارد و تنها تعداد مع...

متن کامل

تولید آنتی توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ E

  اهداف: توکسین بوتولینوم به‌­عنوان قوی­‌ترین توکسین شناخته می­‌شود. این توکسین علاوه بر کاربردهای درمانی در پزشکی (بوتاکس)، تهدیدی در جنگ­‌های زیستی و بیوتروریسم است. تهیه آنتی­‌بادی علیه توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A تا G علاوه بر کاربرد در شناسایی جدایه‌های کلستریدیوم بوتولینوم توکسیژنیک، در درمان مسمومیت ناشی از این توکسین نیز نقش دارد. هدف از این مطالعه، تولید آنتی­‌توکسین کلستریدیوم ب...

متن کامل

همسانه‌سازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع B باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری E. coli

   Backgrounds & Aims: Botulism is caused by botulinum toxin. The best way to avoid the neurotoxin syndrome caused by BONT/B is to use recombinant vaccine made of BONT/B binding domain because binding domain has sufficient epitops to stimulate immune response. Materials & Methods: Initially BONT/B binding domain gene sequence were obtained from GenBank. Then the primers were designed. PCR react...

متن کامل

شناسایی لشمانیوز پوستی با استفاده از روش Multiplex PCR

Introduction: Annually, more than 14 million people are reported to be infected with Leishmaniasis all over the world. In Iran, this disease is seen in the form of cutaneous and visceral leishmaniasis, of which the cutaneous form is more wide spread. In recent years, cutaneous leishmaniaisis is diagnosed by PCR utilizing specific primers in order to amplify different parasite genes including ri...

متن کامل

تولید آنتی توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ e

اهداف: توکسین بوتولینوم به ­عنوان قوی­ ترین توکسین شناخته می­ شود. این توکسین علاوه بر کاربردهای درمانی در پزشکی (بوتاکس)، تهدیدی در جنگ­ های زیستی و بیوتروریسم است. تهیه آنتی­ بادی علیه توکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a تا g علاوه بر کاربرد در شناسایی جدایه های کلستریدیوم بوتولینوم توکسیژنیک، در درمان مسمومیت ناشی از این توکسین نیز نقش دارد. هدف از این مطالعه، تولید آنتی­ توکسین کلستریدیوم بوت...

متن کامل

شناسایی ژن های انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده Multiplex PCR

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان می باشد. در تحقیقات مختلف مشخص گردیده است که 18-15 درصد سویه های استافیلوکوکوس که از منابع مختلف جدا می شود قادر به تولید انتروتوکسین می باشند که فاکتور اصلی مسمومیت می باشند. هدف از تحقیق حاضر شناسایی ژنهای انتروتوکسین نظیر: (femA،see ،sed ،sec ،seg ،seb، sea) در استافیلوکوکوس اورئوس که با استفاده از روش PCR چندگانه ا...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله طب نظامی

جلد ۷، شماره ۳، صفحات ۲۳۱-۲۳۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023